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介紹液相色譜儀的使用方法
  • 發(fā)布日期:2016-01-04     信息來源:      瀏覽次數(shù):3067
    • 液相色譜儀的品牌、種類很多,各家的使用方法也不盡一樣,主要看你是那一款的液相色譜儀,當(dāng)初購買設(shè)備時(shí),廠家的工程師會培訓(xùn)使用方法。液相色譜儀與結(jié)構(gòu)儀器的聯(lián)用是一個(gè)重要的發(fā)展方向。液相色譜-質(zhì)譜連用技術(shù)受到普遍重視,如分析氨基甲酸酯農(nóng)藥和多核芳烴等;液相色譜-紅外光譜連用也發(fā)展很快如在環(huán)境污染分析測定水中的烴類,海水中的不揮發(fā)烴類,使環(huán)境污染分析得到新的發(fā)展。

      液相色譜儀的使用方法:

      內(nèi)容:

      1  開機(jī)

      1.1  打開電腦。

      1.2  打開液相色譜各個(gè)模塊的電源。

      1.3  雙擊桌面“儀器—聯(lián)機(jī)",進(jìn)入聯(lián)機(jī)界面。

      1.4  排氣:

      1.4.1  手動旋開處沖洗閥(逆時(shí)針旋轉(zhuǎn)約1圈)。
      1.4.2   右鍵單擊“泵"圖標(biāo)區(qū)域,選擇“方法…"選項(xiàng),進(jìn)入泵編輯畫面,設(shè)流速:5ml/min(一般為3-5ml/min),點(diǎn)擊“確定"。

      1.4.3  右鍵單擊“泵" 圖標(biāo),點(diǎn)擊“控制…"選項(xiàng),選中“ON",點(diǎn)擊“確定",則系統(tǒng)開始沖洗,直到管線內(nèi)(由溶劑瓶到泵入口)無氣泡為止,(一般為5分鐘),切換通道繼續(xù)沖洗,直到所有要用通道無氣泡為止。

      1.4.4  右鍵單擊“泵" 圖標(biāo),點(diǎn)擊“方法…"選項(xiàng),設(shè)流速:0ml/min,手動旋緊沖洗閥。

      1.4.5  右鍵單擊“泵"圖標(biāo),點(diǎn)擊“方法…"選項(xiàng),按照方法要求選擇合適比例的流動相,設(shè)流速:1.0ml/min。

      1.4.6  同理右鍵單擊“柱溫箱",“檢測器"圖標(biāo),點(diǎn)擊“方法…"選項(xiàng),按照方法的要求設(shè)置溫度,波長,點(diǎn)擊“控制" 選項(xiàng),“ON"打開柱溫箱和檢測器。

      2  編輯方法

      2.1  點(diǎn)擊“方法"-“編輯完整方法"開始編輯完整方法。

      2.2  選中除“數(shù)據(jù)分析 "外的三項(xiàng),進(jìn)入下一選項(xiàng)卡。

      2.3  方法信息:在“方法注釋"中加入方法的信息(如:This is for test!)。進(jìn)入下一選項(xiàng)卡。

      2.4  參數(shù)設(shè)定:在“流速"處輸入流量, 如1.0ml/min,停止時(shí)間:如10 min(該停止時(shí)間僅為做一個(gè)樣品需要的時(shí)間),按照要求選擇合適比例的流動相配比,如乙腈:水=75:25,A為水,B為乙腈,則設(shè)置B:75%即可。進(jìn)入下一選項(xiàng)卡。

      2.5  自動進(jìn)樣器參數(shù)設(shè)定: 選擇“洗針進(jìn)樣"----可以輸入進(jìn)樣體積和洗瓶位置,進(jìn)入下一選項(xiàng)卡。

      2.6  柱溫箱參數(shù)設(shè)定: 在“溫度"下面的空白方框內(nèi)輸入所需溫度,如:40度。進(jìn)入下一選項(xiàng)卡。

      2.7  UV檢測器參數(shù)設(shè)定: 在“波長"下方的空白處輸入所需的檢測波長,如254nm。點(diǎn)擊確定。

      2.8   在“ 運(yùn)行時(shí)選項(xiàng)表 "中,選中“ 數(shù)據(jù)采集",點(diǎn)擊“確定"。
      2.9  從“方法"菜單,選中“方法另存為…",輸入一方法名,如“測試",點(diǎn)擊“確定。

      3  單次采集

      3.1  從“運(yùn)行控制"菜單中,選擇“樣品信息"選項(xiàng),選擇合適的路徑,在“數(shù)據(jù)文件"中選擇 “前綴/計(jì)數(shù)器",輸入樣品瓶的位置,點(diǎn)擊“確定"。

      3.2 基線平穩(wěn)后約10分鐘,從“運(yùn)行控制"菜單中選擇“運(yùn)行方法"。

      4  多次數(shù)據(jù)采集

      4.1  按照步驟2 編輯完整方法。

      4.2  點(diǎn)擊“序列"-“序列表",輸入“樣品瓶"“樣品名稱",“進(jìn)樣次數(shù)",選擇合適的“做樣方法"

      4.3  點(diǎn)擊“序列"-“序列參數(shù)",選擇序列數(shù)據(jù)的保存路徑(序列會自動生成以“序列名稱-時(shí)間"為名稱的文件夾保存數(shù)據(jù)),數(shù)據(jù)建議以選擇 “前綴/計(jì)數(shù)器"保存。

      4.4  從“序列"菜單,選中“序列另存為…",輸入一序列名,如“測試",點(diǎn)擊“確定。

      4.5  從“運(yùn)行控制"菜單中選擇“運(yùn)行序列"。

      5  數(shù)據(jù)分析(脫機(jī)狀態(tài)使用)

      5.1  雙擊“儀器 —脫機(jī)"圖標(biāo) 進(jìn)入的脫機(jī)畫面。

      5.2  從“視圖"菜單中,點(diǎn)擊“數(shù)據(jù)分析"進(jìn)入數(shù)據(jù)分析畫面。

      5.3  從“文件"菜單選擇“調(diào)用信號",選中您的數(shù)據(jù)文件名。點(diǎn)擊“ 確定",則數(shù)據(jù)被調(diào)出。(如預(yù)建立標(biāo)準(zhǔn)曲線,應(yīng)先打開濃度較低的標(biāo)樣圖譜。)

      5.4  做譜圖優(yōu)化:從“圖形"菜單中選擇“信號選項(xiàng)"。從“范圍" 中選擇“滿量程" 或“自動量程" 及合適的時(shí)間范圍或選擇“自定義量程" 調(diào)整。反復(fù)進(jìn)行,直到圖的比例合適為止。點(diǎn)擊“ 確定"。

      6  積分:

      6.1  從“積分"菜單中選擇“積分事件"選項(xiàng),選擇合適的“斜率靈敏度",“峰寬",“zui小峰面積",“zui小峰高"。點(diǎn)擊 ,自動加載積分參數(shù)。

      6.2  點(diǎn)擊左邊“√"圖標(biāo),將積分參數(shù)存入方法并退出“積分事件"。

      6.3  如積分結(jié)果不理想,則修改相應(yīng)的積分參數(shù),直到滿意為止。

      7  標(biāo)準(zhǔn)曲線

      7.1  點(diǎn)擊“校正"-“校正設(shè)置",輸入“含量單位"。

      7.2  點(diǎn)擊“校正"-“新建校正表",點(diǎn)擊確定。輸入“化合物名稱"和“含量",點(diǎn)擊“確定",按照提示刪除其他組分。

      7.3  至此完成單級校正,如要增加校正級別,應(yīng)從“文件"菜單選擇“調(diào)用信號",選中您的數(shù)據(jù)文件名(第二個(gè)標(biāo)樣),點(diǎn)擊“校正"-“添加級別",點(diǎn)擊確定,輸入“含量",依次增加校正級別。

      8  打印報(bào)告

      8.1   從“報(bào)告"菜單中選擇“設(shè)定報(bào)告"選項(xiàng),點(diǎn)擊“定量結(jié)果"框中“定量"右側(cè)的黑三角,選中“外標(biāo)法",其它選項(xiàng)不變,點(diǎn)擊“ 確定"。

      8.2  從“報(bào)告"菜單中選擇“打印報(bào)告",則報(bào)告結(jié)果將打印到屏幕上,如想輸出到打印機(jī)上,則點(diǎn)擊“報(bào)告" 底部的“打印"鈕。

      8.3  點(diǎn)擊“文件"-“另存為"-“方法",把數(shù)據(jù)分析方法保存,下次分析可直接在“文件"-“調(diào)用"-“方法"下,將該方法調(diào)出使用。(調(diào)用的方法中含有積分方法,標(biāo)準(zhǔn)曲線方法和打印報(bào)告方法)

      9  關(guān)機(jī)

      9.1  關(guān)機(jī)前,先關(guān)紫外燈,用相應(yīng)的溶劑(甲醇或乙腈)充分沖洗系統(tǒng)大約30分鐘。(色譜柱zui終應(yīng)保存在甲醇或乙腈中)

      9.2  退出化學(xué)工作站,依提示關(guān),及其它窗口,關(guān)閉計(jì)算機(jī)。

      9.3 關(guān)閉Agilent 1260各模塊電源開關(guān)。

      10  其它注意事項(xiàng)

      10.1 當(dāng)樣品運(yùn)行時(shí),切勿打開自動進(jìn)樣器前遮蓋,否則進(jìn)樣過程停止。

      10.2 系統(tǒng)發(fā)生漏液時(shí),機(jī)器會檢測到并停止進(jìn)樣,狀態(tài)指示燈為紅色。檢查擦干并安置好漏液處,擦干漏液傳感器,單擊ON按鈕,系統(tǒng)重新初始化。

      10.3 注意紫外燈使用壽命,切勿來回開關(guān)紫外燈。

      液相色譜法只要求樣品能制成溶液,不受樣品揮發(fā)性的限制,流動相可選擇的范圍寬,固定相的種類繁多,因而可以分離熱不穩(wěn)定和非揮發(fā)性的、離解的和非離解的以及各種分子量范圍的物質(zhì)。與試樣預(yù)處理技術(shù)相配合,HPLC所達(dá)到的高分辨率和高靈敏度,使分離和同時(shí)測定性質(zhì)上十分相近的物質(zhì)成為可能,能夠分離復(fù)雜相體中的微量成分。隨著固定相的發(fā)展,有可能在充分保持生化物質(zhì)活性的條件下完成其分離HPLC成為解決生化分析問題zui有前途的方法。由于HPLC具有高分辨率、高靈敏度、速度快、色譜柱可反復(fù)利用,流出組分易收集等優(yōu)點(diǎn),因而被廣泛應(yīng)用到生物化學(xué)、食品分析、醫(yī)藥研究、環(huán)境分析、無機(jī)分析等各種領(lǐng)域。

      上海嘉鵬科技有限公司專業(yè)生產(chǎn):紫外分析儀、三用紫外分析儀、暗箱式紫外分析儀、暗箱三用紫外分析儀、暗箱紫外分析儀、手提式紫外分析儀、三用紫外分析儀暗箱式、紫外檢測儀、部分收集器、恒流泵、蠕動泵、凝膠成像系統(tǒng)、凝膠成像分析系統(tǒng)、化學(xué)發(fā)光成像分析系統(tǒng)、光化學(xué)反應(yīng)儀、旋渦混合器、漩渦混合器、玻璃層析柱、梯度混合器、梯度混合儀、核酸蛋白檢測儀、玻璃層析柱、熒光增白劑測定儀、餾分收集器、切膠儀、藍(lán)光切膠儀、層析系統(tǒng)等產(chǎn)品。咨詢。