那么下面上海嘉鵬科技有限公司為大家簡單介紹一下關(guān)于聚丙烯酰胺凝膠電泳(PAGE)的原理:
SDS-PAGE(聚丙烯酰胺凝膠電泳)是一種用于根據(jù)蛋白質(zhì)混合物的大小分離其成分的分析方法。
該技術(shù)基于這樣的原理,即帶電分子將在電場中朝具有相反符號的電極遷移。常規(guī)電泳技術(shù)不能用于確定生物分子的分子量,因為物質(zhì)在凝膠中的遷移率取決于電荷和大小。
為了克服這個問題,需要對生物樣品進行處理,以使其獲得均勻的電荷,然后電泳遷移率主要取決于尺寸。對于這種具有不同形狀和大小的蛋白質(zhì)分子,需要進行變性(在SDS的幫助下完成),以使蛋白質(zhì)失去二級,三級或四級結(jié)構(gòu)。被SDS覆蓋的蛋白質(zhì)帶負電,并在上樣時凝膠并置于電場中,它將朝著陽極(帶正電的電極)遷移,并通過基于分子篩分作用的大小分開。通過染色(蛋白質(zhì)特異性)技術(shù)進行可視化后,可以通過將蛋白質(zhì)的遷移距離與已知分子量階梯(標記)的遷移距離進行比較來計算蛋白質(zhì)的大小。
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