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凝膠成像系統(tǒng)的基本選購(gòu)原則
  • 發(fā)布日期:2018-06-28     信息來源:      瀏覽次數(shù):2239
    • “只選對(duì)的,不選貴的”市場(chǎng)上各品牌、各型號(hào)的成像儀林林種種,但是從成像原理上可以分成兩大類,分別是拍照成像和掃描成像。拍照成像簡(jiǎn)單說就是樣品和相機(jī)的相對(duì)位置不動(dòng),可以進(jìn)行單次成像或多次成像;掃描成像則是相機(jī)對(duì)樣品進(jìn)行局部成像,然后通過樣品或相機(jī)的移動(dòng)對(duì)整個(gè)樣品進(jìn)行成像。拍照成像目前主要采用CCD相機(jī)成像,由于可以設(shè)置不同的曝光時(shí)間,常被用來進(jìn)行微弱的化學(xué)發(fā)光及生物發(fā)光的成像。而掃描成像則由于精度高、重復(fù)性好被廣泛用于大型樣品以及多通道成像中??梢哉f,對(duì)于大型樣品或多通道應(yīng)用,能選擇掃描成像的,盡量不要選擇拍照成像。原理搞清楚了,選擇起來就簡(jiǎn)單了。不同的原理導(dǎo)致了不同應(yīng)用的選擇,所以千萬(wàn)不要相信什么“王”之類的鬼話,沒有任何一款機(jī)器可以通吃所有應(yīng)用領(lǐng)域。
      下面就實(shí)驗(yàn)室常見的一些應(yīng)用簡(jiǎn)單的說明選擇的依據(jù):核酸電泳凝膠:一般此類凝膠都采用EB染色、紫外激發(fā),而且凝膠較小。推薦采用一般的凝膠成像設(shè)備即可完成。蛋白電泳凝膠:一般此類凝膠采用考染或銀染,白光透射成像。對(duì)于小型凝膠您可以選擇一般的凝膠成像設(shè)備,但是對(duì)于大型凝膠,特別是雙向電泳凝膠,由于CCD拍照成像會(huì)有幾何扭曲,而且透鏡效應(yīng)也會(huì)導(dǎo)致不同區(qū)域的信號(hào)強(qiáng)度差異,另外CCD拍照也無(wú)法保證不同凝膠的成像參數(shù)保持一致,因此掃描成像是選擇。轉(zhuǎn)印膜:這個(gè)稍微有些復(fù)雜。一般轉(zhuǎn)印膜有比色法顯色、同位素、化學(xué)發(fā)光和熒光等不同檢測(cè)手段。比色法顯色就是產(chǎn)生有顏色的條帶或斑點(diǎn),一般采用普通的凝膠成像設(shè)備即可。同位素可以采用壓膠片曝光的方法,但是費(fèi)時(shí)、費(fèi)力而且容易過飽和。比較通用的方法是由FujiFilm在1981年發(fā)明的磷屏成像技術(shù),獲得信號(hào)潛影的磷屏通過激光掃描就可以獲取同位素的信號(hào)。而化學(xué)發(fā)光是目前常用的蛋白印跡的檢測(cè)手段,無(wú)疑,冷CCD拍照成像對(duì)這種微弱的光信號(hào)是合適的。熒光是所有這些檢測(cè)手段中令人贊嘆的和有前景的。這不僅僅是因?yàn)闊晒馊玖暇哂袑挼膭?dòng)態(tài)范圍,而且還在于它能夠?yàn)槲覀兲峁┒嗤返臋z測(cè)途徑(同樣適用于凝膠)。當(dāng)然,您可以使用單一熒光檢測(cè),這時(shí)您對(duì)凝膠成像設(shè)備的要求就包括了新的激光光源和相應(yīng)的濾光片。
      如果您是一個(gè)主義者,或者您需要對(duì)鄰近或重疊的目標(biāo)分子進(jìn)行成像,那么多通道熒光檢測(cè)是您的*。這時(shí)掃描成像是選擇,這樣選擇不僅僅是因?yàn)閽呙璩上衲軌驇砀叩撵`敏度和分辨率,更重要的是,不同通道之間沒有幾何扭曲,擬合性好。微孔板及其他特殊需求:對(duì)于拍照成像而言,由于幾何扭曲的問題,對(duì)微孔板成像就變得比較復(fù)雜了,一般必須一個(gè)的校正裝置才可完成。當(dāng)然,如果采用掃描成像一般不需要任何額外附件。很多實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)在都對(duì)小動(dòng)物成像非常感興趣,然而對(duì)小動(dòng)物進(jìn)行真的不是一件簡(jiǎn)單的事,一方面小動(dòng)物需要進(jìn)行麻醉和固定;另一方面還需要對(duì)信號(hào)位置進(jìn)行三維定位。因此,能同時(shí)提供功能、代謝和解剖圖像的PET/CT是進(jìn)行這類成像的有力的工具。

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